果树学报

2019, v.36(09) 1121-1129

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四川省猕猴桃病毒A外壳蛋白基因的序列分析、原核表达及抗血清制备
Sequence analysis, prokaryotic expression and antiserum preparation of coat protein gene of Actinidia virus A in Sichuan province

吕蕊;彭期定;杨婷;林宏辉;董家红;席德慧;

摘要(Abstract):

【目的】研究猕猴桃病毒A(Actinidia virus A,AcVA)的发生及其多样性,为我国猕猴桃产业中AcVA病毒的快速检测、科学防控以及猕猴桃品种选育提供科学依据。【方法】通过巢式PCR从四川省猕猴桃感病叶片中扩增AcVA CP基因序列,进行序列分析和同源性比对;构建AcVA CP基因的原核表达载体,诱导目的蛋白表达后制备抗血清,用Western blot检测效价。【结果】克隆到3个AcVA四川分离株的完整CP基因序列,成功构建了pET28a-AcVA-DJY4-CP重组质粒,原核表达目的蛋白并制备出特异性抗血清,效价达到1∶5 000。【结论】首次获得了3个AcVA四川分离株,丰富了AcVA的序列多样性,并探索了原核表达的最佳条件,制备了高效价抗血清,为今后AcVA病毒的快速检测和防控提供了技术支撑。

关键词(KeyWords): 猕猴桃病毒A;外壳蛋白;序列分析;原核表达;抗血清制备

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金(31772131);; 四川省应用基础研究项目(2019YJ0135)

作者(Author): 吕蕊;彭期定;杨婷;林宏辉;董家红;席德慧;

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