- 范家琪;吴金龙;李勇;别航灵;王蛟;郭健;曹珂;王力荣;
【目的】分析桃果实成熟过程中类胡萝卜素总量与关键基因PpCCD4表达的相关性,探究不同品种PpCCD4启动子的活性差异,进而解释PpCCD4在黄白肉果实中的表达差异。【方法】测定果实发育时期类胡萝卜素总含量,并与该时期PpCCD4的表达进行相关性分析,分别检测果实PpCCD4转录本差异,进行基因全长与启动子序列分析。构建PpCCD4启动子驱动GUS表达载体并转化农杆菌侵染桃果肉,根据果肉GUS染色分析2种启动子活性的差异,以期解释PpCCD4在果实发育时期表达量的差异。【结果】‘燕红’成熟过程中果实类胡萝卜素总含量降低,其PpCCD4在发育过程中的表达显著上调‘;金童6号’果实类胡萝卜素总含量升高,其PpCCD4的表达始终处于较低水平‘。金童6号’中PpCCD4相较‘燕红’在CDS区发生了2个碱基的插入,且两PpCCD4转录本不同,启动子克隆发现‘燕红’对应的启动子有较多的转录增强和启动元件,而黄肉品种则具有更多的抗逆应答元件;同时GUS染色结果表示,桃果肉中2种启动子驱动的GUS染色有明显的显色差异,启动子活性差异显著。【结论】黄肉品种中移码突变的产生造成了PpCCD4的功能丧失;2个品种果肉PpCCD4转录模式不同,其启动子活性的差异是造成PpCCD4在黄肉和白肉果实中表达差异显著的主要原因。
2020年09期 v.37 1271-1280页 [查看摘要][在线阅读][下载 838K] [下载次数：624 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：0 ] - 王富强;李贝贝;樊秀彩;张颖;刘崇怀;姜建福;
【目的】筛选一套适合我国葡萄品种鉴定标准的SSR分子标记,用于构建葡萄品种DNA指纹图谱库,为国内葡萄新品种保护、品种登记和市场维权等提供技术支撑。【方法】基于国内外已报道的葡萄SSR标记,对不同葡萄品种进行PCR扩增,筛选验证相关标记,并分析其遗传多样性和鉴别效率。【结果】以76个葡萄品种为材料,从137个SSR标记中选出30个扩增结果稳定、多态性高、退火温度一致且在染色体上均匀分布的SSR标记;使用‘赤霞珠‘’霞多丽’和‘红地球’3个品种验证30个标记的稳定性和可靠性,并确定‘霞多丽‘’红地球’为参照品种;遗传多样性分析显示,30个标记的多态性高,在52份材料中共获得309个等位基因,变化范围为4～16个,VVMD28标记扩增等位基因数最多,其次是VVS2和VMC1C10,Vchr17a标记最少,PIC值变化范围在0.40～0.88,均值为0.75,最高的为VrZAG79标记;聚类分析结果与52个品种的系谱关系基本一致;仅用VMC4F3-1标记可区分25个品种,最多使用8个标记可完全区分52个品种。【结论】从137个葡萄标记中筛选出30个标记,构建了一套适用于中国的葡萄SSR分子标记体系,同时为保证鉴定效率和国际品种鉴定接轨,选择VVMD28、VVMD32、VVMD27、VrZAG79、VVMD7、VrZAG62、VVMD25、VVS2、VVMD5这9个标记作为体系的核心引物,其他标记作为扩展引物。
2020年09期 v.37 1281-1293页 [查看摘要][在线阅读][下载 1545K] [下载次数：856 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：18 ] |[阅读次数：0 ] - 聂园军;郭慧娜;张春芬;肖蓉;邓舒;李倩;曹秋芬;
【目的】克隆1个枣树超氧化物歧化酶基因ZjSOD1,并对其功能进行研究,为其在枣树抗逆基因工程改良中的利用奠定基础。【方法】采用PCR克隆ZjSOD1 cDNA序列,运用实时定量RT-PCR方法研究其在高盐和PEG6000胁迫下转录水平的变化。构建ZjSOD1过量表达载体转化拟南芥,研究其在拟南芥中响应非生物胁迫应答的功能,测定氧化酶活性及生理指标。【结果】ZjSOD1基因cDNA序列开放阅读框全长为699 bp,编码232个氨基酸,理论等电点为8.59,属于Fe-SOD家族成员。在转录水平上,ZjSOD1明显受NaCl和PEG6000诱导。在拟南芥中过量表达ZjSOD1基因导致植株对干旱、高盐更加敏感,但对H_2O_2耐受性显著增强。在NaCl、PEG6000和H_2O_2胁迫条件下,过量表达ZjSOD1转基因植株中SOD、CAT和POD酶活性、脯氨酸和丙二醛含量、电解质渗透率均显著发生改变。实时定量RTPCR结果显示参与活性氧(ROS)、高盐和干旱胁迫相关信号通路的基因在ZjSOD1转基因株系中表达量发生明显改变。【结论】ZjSOD1在植物生长发育过程中参与氧化、干旱、高盐胁迫应答。
2020年09期 v.37 1294-1304页 [查看摘要][在线阅读][下载 1094K] [下载次数：220 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：0 ] - 程丽莉;程运河;曹庆昌;胡广隆;兰彦平;
【目的】褐变过程与多酚氧化酶(Polyphenol oxidases,PPO)密切相关,通过板栗PPO基因家族鉴定及生物信息学分析,为深入阐明PPO蛋白质的功能提供依据。【方法】从最新发布的板栗基因组数据库中鉴定到3个PPO基因:CmPPO1(BUA.CMHBY222345)、CmPPO2(BUA.CMHBY216654)、CmPPO3(BUA.CMHBY216989),并利用生物信息学方法,对其序列和基因编码蛋白的理化性质、结构功能等进行预测。【结果】(1)3个基因的CDS全长分别是1 794、1 809和1 809 bp,分别编码氨基酸序列597、602和602 aa,属于亲水酸性蛋白质,不存在跨膜区,为非分泌蛋白。(2)CmPPOs蛋白酶的二级结构无规则卷曲比例最高,三级空间结构模型分析与蔷薇科苹果酪氨酸酶结构(MdPPO1)序列同源性超过70%。(3)对苹果、马铃薯和板栗3个易褐变物种的23个PPO基因编码蛋白进行多序列比对和保守结构域分析,明确板栗PPO和蔷薇科苹果有较高同源性。(4)对不同品种板栗仁中的PPO基因进行表达分析,只检测到CmPPO1,且表达量与酶活性相关性不显著,表明板栗仁中PPO活性不能直接影响褐变程度,不同品种褐变程度与PPO表达量呈显著相关。【结论】板栗PPO基因家族3个成员中,不同品种CmPPO1表达量与果实受热褐变程度呈显著相关。本研究为板栗抗褐变育种提供了新的基因资源,但鉴于PPO存在同工酶,表达调控机制比较复杂,特异表达和时空差异性有待进一步研究。
2020年09期 v.37 1305-1313页 [查看摘要][在线阅读][下载 1092K] [下载次数：604 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：0 ]
- 罗国涛;刘晓纳;张曼曼;余洪;胡洲;王福生;朱世平;赵晓春;
【目的】明确不同柑橘砧木根系的形态特征及对嫁接植株耐旱性的影响。【方法】以枳及其杂种、香橙、宽皮柑橘等11份不同遗传背景的砧木为试材,测定苗期不同生长时间根系的形态参数。用以‘纽荷尔’脐橙为接穗的不同砧穗组合材料,测定不同砧穗组合植株在干旱胁迫下叶片的相关生理生化指标。【结果】不同柑橘砧木根系的形态结构差异显著。沃尔卡姆、Z-021根系的形态结构综合评价值较高,ZZ-022、Z-006、资阳香橙、XC-009、ZZ-030和KPJ-030的中等,卡里佐枳橙、红柠檬和扁平橘的较低。不同砧穗组合植株的生理生化指标在干旱胁迫下差异明显。综合评价结果表明,ZZ-022、ZZ-030、卡里佐枳橙和扁平橘砧穗组合的植株耐旱综合评价值较高,Z-021、Z-006、资阳香橙、红柠檬和XC-009砧组合植株的耐旱评价值中等,KPJ-030砧组合植株的耐旱评价值最低。【结论】砧木根尖数和总根表面积可作为筛选耐旱砧木的重要指标;枳杂种砧木ZZ-022的根系形态综合评价值较高,其砧穗组合植株的耐旱性也较强,是一个具有较好生产应用潜力的优良砧木。
2020年09期 v.37 1314-1325页 [查看摘要][在线阅读][下载 1085K] [下载次数：1057 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：22 ] |[阅读次数：0 ] - 樊淼淼;陶茹;张天皓;王辉;王爽;孙鲁龙;高华;
【目的】探究不同果袋对‘瑞雪’苹果果实品质的影响,同时为筛选‘瑞雪’苹果专用果袋提供科学参考。【方法】应用常规方法测定果实品质基本指标,采用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用技术测定果实香气成分。【结果】与对照相比,双层果袋处理果实的果面光洁度显著升高,果皮叶绿素含量显著降低,A果袋维生素C含量升高3.33%,果形指数降低了6.52%,果实可溶性固形物含量下降了11.11%,香气物质种类降低50.00%;B果袋果实的香气物质种类降低33.33%;C果袋果实维生素C含量下降了12.10%,香气物质种类降低41.67%;D果袋果实维生素C含量下降了2.93%,香气物质种类降低33.33%;与对照相比,单层果袋显著提高了果实的果面光洁度,果皮叶绿素含量与对照相比无显著差异,E果袋果实与对照相比无显著差异;F果袋果实香气物质种类降低20.83%;G果袋果实的可滴定酸含量显著升高了20.00%,果形指数降低了5.43%,香气物质种类降低29.17%;其他指标与对照相比无显著差异。【结论】B果袋和E果袋显著提升了果实的外观品质,同时,对果实内在品质影响较小,所以推荐‘瑞雪’苹果在生产中使用B果袋和E果袋。
2020年09期 v.37 1326-1335页 [查看摘要][在线阅读][下载 843K] [下载次数：712 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：24 ] |[阅读次数：0 ] - 何雪菲;马泽跃;张文太;陈波浪;张茜;柴仲平;
【目的】研究施氮水平对‘库尔勒香梨’树体生长和氮素吸收利用的影响,为合理施肥及提高氮肥利用率提供参考。【方法】以6 a(年)生的‘库尔勒香梨’树体为研究材料,采用~(15)N示踪技术,研究不同施氮水平下‘库尔勒香梨’树体的生长状况和对氮素的吸收、分配及利用特性。【结果】在不同的施氮水平下,‘库尔勒香梨’树体的生物量、氮素积累量随生育期的推进和施氮水平的提高而增加,均表现为N_3>N_2>N_1>N_0。‘库尔勒香梨’树体各器官的Ndff值在不同施氮水平下差异较大,各生育期均表现为N_3水平下最大,N_2次之,N_1最小。在果实成熟期时,不同施氮水平下果实~(15)N分配率存在差异,N_2水平下~(15)N分配率(31.79%)显著高于N_3(23.86%)和N_1(23.76%)。‘库尔勒香梨’树体~(15)N利用率随生育期的推进显著提高,在果实成熟期树体~(15)N利用率表现为N_2(20.19%)>N_1(16.86%)>N_3(15.58%)。【结论】氮肥施入至果实成熟期,在N_2水平下果实的生物量和对氮素的积累量达到最大值,树体对肥料~(15)N-尿素的利用率也达到最高(20.19%)。因此,在‘库尔勒香梨’的栽培中,应该适宜控制氮素的投入,明确最适的氮肥用量,从而提高树体的氮肥利用率和果实产量,推荐6 a生‘库尔勒香梨’施氮水平为每666.7 m~2施氮20 kg。
2020年09期 v.37 1336-1345页 [查看摘要][在线阅读][下载 981K] [下载次数：470 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：25 ] |[阅读次数：0 ] - 魏灵珠;沈碧薇;程建徽;向江;崔鹏飞;李明山;吴江;
【目的】研究不同砧木对‘新雅’葡萄物候期、生长结果习性、果实品质和果穗染病情况的影响,筛选出染病果穗率低、果实着色良好且综合品质优良的砧穗组合。【方法】以20种砧木嫁接‘新雅’‘,新雅’扦插自根树作对照,对植株的生长物候期、生长结果习性、果实品质和果穗染病情况进行调查和测定,采用主成分分析法进行综合评价。【结果】由主成分分析法综合评价得到,试验材料的排名顺序‘:110R’>‘101-14’>‘Rupestrisdulot’>自根树>‘尤木特’>‘抗砧1号’>‘420A’>‘哥洛尔’>‘225Ru’>‘5BB’>‘道格里吉’>‘5C’>‘华佳8号’>‘SO4’>‘沈530’>‘3309C’>‘自由’>‘抗砧3号’>‘抗砧5号’>‘1103P’>‘麦可达木斯’‘。110R‘’101-14’和‘Rupestrisdulot’砧嫁接树的综合排名在自根树之前。其中‘110R’砧嫁接树的果实硬度、穗质量和总糖含量高于自根树,日(气)灼病穗率、灰霉病穗率分别比自根树低81.48%、37.50%,果穗稍有缩果,无炭疽病,但果穗裂果率比自根树高66.67%,果皮花色素苷含量低于自根树‘。101-14’砧嫁接树的穗质量、株产量、果实总糖含量和可溶性固形物含量高于自根树,果皮花色素苷含量与自根树差异不显著,日(气)灼病穗率、裂果病穗率、灰霉病穗率分别比自根树低63.77%、8.03%、72.83%,果穗稍有缩果和炭疽病‘。Rupestrisdulot’砧的嫁接树株产量、总糖含量和果皮花色素苷含量高于自根树,日(气)灼病穗率、裂果病穗率、灰霉病穗率分别比自根树低50.98%、26.47%、63.24%,无缩果和炭疽病穗。【结论】‘101-14’和‘Rupestrisdulot’砧均可作‘新雅’的嫁接砧木,其中‘Rupestrisdulot’砧更为适宜,改善了果皮着色,降低了染病果穗率。
2020年09期 v.37 1346-1357页 [查看摘要][在线阅读][下载 778K] [下载次数：517 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：18 ] |[阅读次数：0 ] - 田青兰;吴艳艳;黄伟华;刘洁云;韦绍龙;牟海飞;韦弟;黄永才;熊晓兰;张英俊;
【目的】探究国内主栽西番莲品种的成花坐果特性及与温度、光照强度等气象因子的关系,明确其优势坐果枝蔓和节位以及影响成花坐果的关键气象因素和主要影响时段。【方法】以国内主栽西番莲品种‘台农1号’为研究对象,采用单因素随机区组法,调查不同节位、不同枝蔓的花芽分化率、花芽退化率及坐果率,并分析不同生长季各级枝蔓的成花坐果特性及与温光等气象因子的相关关系。【结果】(1)‘台农1号’西番莲夏秋季平均花芽分化率为77.2%,平均花芽退化率为41.4%,平均坐果率为36.5%,整体表现为花芽分化多退化也多,坐果率较低。不同节位间呈现基部节位花芽分化少,端部节位花芽退化多的特征;其中,4～7节位花芽分化数较多且坐果率稳定,为优势坐果节位。二级蔓的花芽分化基数较大,且坐果数较多;基部1～3节位着生的一级蔓和二级蔓的花芽性状优于第3节位之后着生的枝蔓。(2)相关关系分析结果显示,在开花前20～35 d日最高温度和日平均温度与单株花芽分化率和花芽退化率均呈显著负相关;其次,开花当日最高温度和平均温度分别高于36.19℃和26.24℃时坐果率随温度升高而下降,且开花后5～20 d的日最高温度与一级蔓和二级蔓坐果率均呈显著负相关。进一步分析表明,花芽形成期最高温/最低温34.2/20.4℃～36.7/23.4℃条件下,不利于二级蔓和三级蔓花芽形成;而越接近花芽分化后期,日平均光照强度为4.00～4.79 klx,光照强度越大则二级蔓和三级蔓的花芽分化率和退化率越高,而低温加弱光条件下花芽分化则受到抑制。此外,日平均相对湿度与二级蔓成花坐果性状呈负相关关系。【结论】‘台农1号’西番莲优势坐果节位为4～7节位,优势坐果枝蔓为二级蔓,且花前20～35 d和开花当天及花后5～20 d的高温分别是限制其花芽形成和坐果的最主要气象因素。
2020年09期 v.37 1358-1370页 [查看摘要][在线阅读][下载 1607K] [下载次数：449 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：20 ] |[阅读次数：0 ] - 邵微;于会丽;张培基;徐国益;乔宪生;高登涛;王志强;田鹏;司鹏;
【目的】从根际微生物群落代谢与组成方面探讨不同落叶果树根际差异性。【方法】利用Biolog ECO板方法与Illumina Miseq sequencing技术,以未种植果树区域土壤为对照,研究苹果、梨及葡萄等8种落叶果树根际微生物群落的代谢与组成。【结果】8种果树根际微生物的代谢活性与功能多样性指数(除Pielou均匀度指数E外)均显著高于对照。比较8种果树根际微生物群落的碳源利用特征情况发现,杏树根际微生物群落对酚酸类物质(PC,phenolic compounds)的利用比率显著下降,对碳水化合物(CH, carbohydrate)的利用比率显著上升,而对照土壤微生物群落对氨基酸类(AA,amino acids)碳源利用比率最高。细菌与真菌群落纲水平相对丰度表明,8种果树根际细菌与真菌群落相对丰度存在明显差异,其中苹果与核桃γ-变形菌纲相对丰度较其他果树显著上升;而与细菌群落相比,8种果树根际真菌群落在纲水平上差异更为明显。基于纲水平优势菌与微生物群落代谢之间的相关性分析表明,微生物群落代谢与Betaproteobacteria、Alphaproteobacteria及Sphingobacteriia呈显著正相关,而与Gemmatimonadetes、Sordariomycetes、Glomeromycetes及Chytridiomycetes均呈显著负相关。另外,RDA分析表明,微生物功能多样性(除E外)与细菌α多样性呈正相关,而与真菌α多样性呈负相关。【结论】8种果树微生物群落碳代谢存在显著差异。8种果树根际细菌与真菌群落均存在显著差异,而真菌群落较细菌差异更为显著。根际微生物群落代谢与细菌群落呈正相关,而与真菌群落呈负相关。
2020年09期 v.37 1371-1383页 [查看摘要][在线阅读][下载 1307K] [下载次数：797 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：15 ] |[阅读次数：0 ]
- 晏建红;关巍;宾羽;黄洋;周常勇;赵廷昌;
【目的】柑橘黄龙病(Citrus Huanglongbing,HLB)是柑橘产业的头号杀手,其病原主要是韧皮部杆菌属亚洲种(Candidatus Liberibacter asiaticus,CLas),为革兰氏阴性菌,田间主要经亚洲柑橘木虱(Diaphorina citri)传播,为深入研究该病菌分泌蛋白的功能,笔者筛选其中1个分泌蛋白,进行原核表达并制备抗体。【方法】设定4点条件从Prasad等预测的166个分泌蛋白基因中筛选,与pET-28a构建重组表达载体,以原核表达的融合蛋白作为抗原,用于注射兔子,制备多克隆抗体。【结果】从预测的166个分泌蛋白基因中筛选出05150基因,成功构建表达载体pET-28a-05150,表达菌株pET-28a-05150在18℃、0.1 mmol·L~(-1) IPTG浓度条件下诱导的目的蛋白为包涵体。获得的pET-28a-05150抗血清通过ELISA效价为1∶4 000,通过dot ELISA检测手段可与田间感病样品发生显色反应,通过Western blot能与融合蛋白杂交出特异性条带。【结论】该研究筛选了CLas的分泌蛋白基因05150,以其体外表达蛋白制备了pET-28a-05150抗血清,为研究05150基因功能奠定前期基础,也为建立HLB的血清学检测手段及探究柑橘黄龙病菌分泌蛋白基因的筛选方法提供参考。
2020年09期 v.37 1384-1393页 [查看摘要][在线阅读][下载 877K] [下载次数：360 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：4 ] |[阅读次数：0 ] - 张艳婷;仇智灵;李阿根;吴鉴艳;毛程鑫;张传清;
【目的】明确樱桃褐腐病病原菌种类,探究病原菌对啶酰菌胺、苯醚甲环唑、甲基硫菌灵及嘧菌酯的抗性现状。【方法】根据科赫式法则对采集的樱桃褐腐病病样进行了病原菌分离、鉴定及致病性测定,并测定了该病原菌对啶酰菌胺、苯醚甲环唑、甲基硫菌灵及嘧菌酯的抗性。【结果】浙江省樱桃褐腐病病原菌共有3种:美澳型核果链核盘菌Monilinia fructicola占65.6%,核果链核盘菌M. laxa占18.8%,果生链核盘菌M. fructigena占15.6%。所有菌株在接种樱桃果实后,均能引起发病,但病斑大小有显著差异,其中樱桃褐腐病病原菌M. laxa的致病力最强,M. fructicola次之,M.fructigena的致病力最弱。浙江省樱桃褐腐病病原菌对甲基硫菌灵、苯醚甲环唑和啶酰菌胺均表现为敏感,仅检测到2株嘧菌酯抗性菌株,抗药性频率为6.25%。抗药性机制研究发现,在抗性菌株的Cyt b编码区未发生G143A点突变现象。【结论】浙江省樱桃褐腐病病原菌共有3种,除了6.25%的嘧菌酯抗性菌株,樱桃褐腐病病原菌对其他3种常用药剂均表现为敏感。
2020年09期 v.37 1394-1403页 [查看摘要][在线阅读][下载 1037K] [下载次数：526 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：8 ] |[阅读次数：0 ]
- 鲁振华;牛良;崔国朝;潘磊;曾文芳;王志强;
‘黄金蜜桃1号’是从92-3-32和‘中油桃4号’杂交后代中选育出的早熟、黄肉桃新品种。单株命名为99-29-41,2003年开始结果,树体生长势中等,树姿较开张,果实圆形,黏核,平均单果质量182 g,果皮着深红色,果肉黄色,溶质,肉质细,汁液中多,风味甜,近核处有红色素。可溶性固形物含量(w,后同)为11.4%～12.8%,总糖10.4%,总酸0.27%,品质优良。郑州地区2月底开始萌动,花蔷薇型,3月下旬开花,花期3～5 d。果实6月上中旬成熟,果实发育期80 d左右,11月初开始落叶,全年生育期230 d左右。可在黄河故道地区广泛栽培。
2020年09期 v.37 1434-1436页 [查看摘要][在线阅读][下载 631K] [下载次数：262 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：8 ] |[阅读次数：0 ] - 武晓红;陈雪峰;王端;赵习平;季文章;袁立勇;张宪成;唐焕英;马文会;景晨娟;
‘金宇’是以‘宇宙红’为母本、‘金太阳’为父本杂交选育而出的极早熟鲜食杏新品种。果实卵圆形,果皮底色橙黄色,光亮洁净,果面有茸毛,果肉橙黄色,肉质细腻,汁液较多,味甜,口感浓郁,无涩味,香气淡;平均单果质量55.2g,大果75 g;离核,苦仁。可溶性固形物含量(w,后同)为14.05%,总糖10.1%,总酸0.76%,可食率96.20%,果实带皮硬度12.6 kg·cm~(-2),维生素C 5.41 mg·100 g~(-1);品质上。果实发育期58 d,在石家庄地区,果实5月下旬成熟,营养生长期220 d;萌芽率73.74%,成枝率15.66%。该品种耐寒、耐旱、耐瘠薄,适应性强,较抗细菌性穿孔病和焦边病。常温下果实可存放5 d左右,耐贮运。可在河北省中南部及生态条件与之相似的华北地区、西北地区等地栽培。大树高接后第2年开始结果,高接第4年平均产量为27 t·hm~(-2),丰产性好。
2020年09期 v.37 1437-1440页 [查看摘要][在线阅读][下载 608K] [下载次数：137 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：4 ] |[阅读次数：0 ]